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细胞基因操作“指南针” 

慢病毒包装服务

    慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNAgRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链RNA,其基因组进入细胞后,在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。慢病毒载体介导的基因表达、RNAi或基因敲除作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。大量文献研究表明,慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等。
慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。

 

慢病毒包装的优点:

1、能将外源基因有效整合入宿主染色体,外源基因表达水平较高、表达稳定;

2、广泛的宿主,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;

3、适用范围广,可用于体外细胞系和活体动物模型,研究蛋白功能、RNAi以及CRISPR-Cas9介导的基因敲除等;

4、转导效率高,不需要转染试剂,目的基因整合到宿主细胞基因组的概率大大增加。


指南针生物拥有丰富的病毒包装经验,成功为很多客户包装出需要的病毒,并且完成相应的功能检测。


实验流程

1.获得目的基因序列;

2.构建慢病毒载体;

3.包装病毒;

4.病毒纯化、浓缩;

5.滴度测定。

6.对照组和实验组感染细胞,利用抗生素筛选,得到稳定单克隆细胞株(可选)。

服务说明:

1.客户提供目的基因的序列,如果提供模板,请告知载体、酶切稳点等信息;

2.若实验材料为原代细胞或者特殊培养的细胞,请先咨询;

3.公司默认提供病毒滴度为1x107-1x108TU/ml,规格1ml

4.目的蛋白的功能验证另外收费。

提交的产品和资料:

1.实验报告;

2.构建好的病毒重组质粒;

3.提供至少1ml滴度>1x107-1x108TU/m的病毒.


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