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慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNA或gRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链RNA,其基因组进入细胞后,在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。慢病毒载体介导的基因表达、RNAi或基因敲除作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。大量文献研究表明,慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等。
慢病毒包装的优点: 1、能将外源基因有效整合入宿主染色体,外源基因表达水平较高、表达稳定; 2、广泛的宿主,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞; 3、适用范围广,可用于体外细胞系和活体动物模型,研究蛋白功能、RNAi以及CRISPR-Cas9介导的基因敲除等; 4、转导效率高,不需要转染试剂,目的基因整合到宿主细胞基因组的概率大大增加。 指南针生物拥有丰富的病毒包装经验,成功为很多客户包装出需要的病毒,并且完成相应的功能检测。 实验流程 1.获得目的基因序列; 2.构建慢病毒载体; 3.包装病毒; 4.病毒纯化、浓缩; 5.滴度测定。 6.对照组和实验组感染细胞,利用抗生素筛选,得到稳定单克隆细胞株(可选)。 服务说明: 1.客户提供目的基因的序列,如果提供模板,请告知载体、酶切稳点等信息; 2.若实验材料为原代细胞或者特殊培养的细胞,请先咨询; 3.公司默认提供病毒滴度为1x107-1x108TU/ml,规格1ml; 4.目的蛋白的功能验证另外收费。 提交的产品和资料: 1.实验报告; 2.构建好的病毒重组质粒; 3.提供至少1ml滴度>1x107-1x108TU/m的病毒. 咨询订购方法: 添加微信17350757166,或发送邮件至邮箱:3482315384@qq.com指南针生物的技术支持将竭诚为您服务
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