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条件性基因敲除相关知识介绍

  利用条件性基因敲除(Conditional knockout,简称CKO),可以通过时间或组织特异性敲除您感兴趣的靶基因,实现更精准的基因敲除,进行更有针对性的研究。

  条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP、 FLP-Frt和Dre-Rox来实现的。其中最为常用的是Cre-LoxP系统,在待敲除的一段目的DNA序列的两端各放置一个LoxP序列,得到Flox (Flanked by loxP) 小鼠。将Flox小鼠与特异性表达Cre的工具鼠交配,即可获得具有组织或细胞特异性敲除目的基因的小鼠。

  这样的Flox小鼠避免了全身敲除小鼠可能出现的胚胎或新生致死,并且与不同的Cre工具鼠组合,可以使目的基因的表达或缺失发生在实验动物发育的任一阶段或组织器官。此外,若与控制Cre表达的其他诱导系统相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控,应用最为广泛的是Cre/ERT系统。

  通过CRISPR基因编辑技术,构建一个条件性基因敲除小鼠模型一般需要6-9个月。

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  通过ES细胞打靶技术,构建一个条件性基因敲除小鼠模型一般需要9-12个月。

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  指南针生物科技提供细胞基因操作实验技术服务,联系方式17350757166。各种载体质粒构建,基因敲低,基因敲除(crispr/cas9/cas12),过表达,诱导表达、病毒包装(慢病毒、腺病毒、腺相关病毒),稳转细胞株构建以及亚细胞荧光定位载体,重组细胞因子等生物试剂,助力科研,解决生物实验技术难关。


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