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什么是人工构建?

  人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有5种内切酶的单一切点。如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind Ⅲ、BamH Ⅰ 或 SalⅠ切点,就会使抗四环素基因失活。这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。

  指南针生物科技提供细胞基因操作实验技术服务(联系方式17350757166)专业提供各种载体质粒构建,基因敲低,敲除crispr/cas9/cas12a,过表达,诱导表达、病毒包装(慢病毒、腺病毒、腺相关病毒),稳转细胞株构建以及亚细胞荧光定位载体,重组细胞因子等生物试剂,助力科研,解决生物实验技术难关。


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